PRP moderne: "PRP klinike"
Në 10 vitet e fundit, skema e trajtimit të PRP ka pësuar ndryshime të mëdha.Nëpërmjet kërkimeve eksperimentale dhe klinike, ne tani kemi një kuptim më të mirë të fiziologjisë së trombociteve dhe qelizave të tjera.Përveç kësaj, disa vlerësime sistematike me cilësi të lartë, meta-analiza dhe prova të kontrolluara të rastësishme kanë treguar efektivitetin e bioteknologjisë PRP në shumë fusha mjekësore, duke përfshirë dermatologjinë, kirurgjinë kardiake, kirurgjinë plastike, kirurgjinë ortopedike, menaxhimin e dhimbjes, sëmundjet e shtyllës kurrizore dhe mjekësinë sportive. .
Karakteristika aktuale e PRP është përqendrimi i tij absolut i trombociteve, i cili ndryshon nga përkufizimi fillestar i PRP (duke përfshirë përqendrimin e trombociteve më të lartë se vlera bazë) në më shumë se 1 × 10 6/μL ose rreth 5 herë më shumë se përqendrimi minimal i trombociteve në trombocitet nga bazë.Në rishikimin e gjerë nga Fadadu et al.Janë vlerësuar 33 sisteme dhe protokolle PRP.Numri i trombociteve të preparatit përfundimtar PRP të prodhuar nga disa prej këtyre sistemeve është më i ulët se ai i gjakut të plotë.Ata raportuan se faktori i trombociteve i PRP u rrit deri në 0.52 me kompletin e rrotullimit të vetëm (Selphyl ®).Në të kundërt, EmCyte Genesis PurePRPII me rrotullim të dyfishtë Përqendrimi i trombociteve i prodhuar nga pajisja është më i larti (1,6 × 10 6 /µL) .
Natyrisht, metodat in vitro dhe ato të kafshëve nuk janë mjedisi ideal i kërkimit për transformimin e suksesshëm në praktikën klinike.Në mënyrë të ngjashme, studimi i krahasimit të pajisjeve nuk e mbështet vendimin, sepse ato tregojnë se përqendrimi i trombociteve midis pajisjeve PRP është shumë i ndryshëm.Për fat të mirë, përmes teknologjisë dhe analizës së bazuar në proteomikë, ne mund të rrisim të kuptuarit tonë për funksionet e qelizave në PRP që ndikojnë në rezultatet e trajtimit.Përpara arritjes së konsensusit për përgatitjet dhe formulimet e standardizuara të PRP-së, PRP duhet të ndjekë formulimet klinike të PRP-së për të promovuar mekanizma thelbësorë të riparimit të indeve dhe rezultate klinike progresive.
Formula klinike PRP
Aktualisht, PRP klinike efektive (C-PRP) është karakterizuar si një përbërje komplekse e komponentëve autologë shumëqelizorë në plazmën me vëllim të vogël të marrë nga një pjesë e gjakut periferik pas centrifugimit.Pas centrifugimit, PRP dhe komponentët e tij të qelizave jo-trombocitare mund të rikuperohen nga pajisja e përqendrimit sipas densiteteve të ndryshme të qelizave (nga të cilat densiteti i trombociteve është më i ulëti).
Përdorimi PurePRP-SP ® Pajisjet për ndarjen e densitetit të qelizave (EmCyte Corporation, Fort Myers, FL, USA) u përdorën për gjakun e plotë pas dy procedurave të centrifugimit.Pas procesit të parë të centrifugimit, përbërësi i tërë i gjakut u nda në dy shtresa bazë, suspensioni i plazmës së trombociteve (i ligët) dhe shtresa e qelizave të kuqe të gjakut.Në A, hapi i dytë i centrifugimit ka përfunduar.Vëllimi aktual i PRP mund të nxirret për aplikimin e pacientit.Zmadhimi në B tregon se ka një shtresë të organizuar me shumë komponentë të sedimentimit të eritrociteve kafe (e përfaqësuar me vijë blu) në fund të pajisjes, e cila përmban përqendrime të larta të trombociteve, monociteve dhe limfociteve, bazuar në gradientin e densitetit.Në këtë shembull, sipas protokollit të përgatitjes së C-PRP me neutrofile të varfër, do të nxirret përqindja minimale e neutrofileve (<0.3%) dhe eritrociteve (<0.1%).
Granulat e trombociteve
Në aplikimin e hershëm klinik të PRP, granulat α janë struktura e brendshme e trombociteve më e përmendur, sepse ato përmbajnë faktorë koagulimi, një numër të madh PDGF dhe rregullatorë angiogjenë, por kanë pak funksion trombogjen.Faktorë të tjerë përfshijnë komponentët e kemokinës dhe citokinës më pak të njohur, si faktori i trombociteve 4 (PF4), proteina bazë para trombociteve, P-selektina (një aktivizues i integrinës) dhe kemokina RANTES (e rregulluar nga aktivizimi, duke shprehur qelizat T normale dhe me sa duket. sekretimi).Funksioni i përgjithshëm i këtyre përbërësve specifikë të granulave të trombociteve është të rekrutojnë dhe aktivizojnë qeliza të tjera imune ose të nxisin inflamacionin e qelizave endoteliale.
Komponentët kokrrizorë të dendur si ADP, serotonina, polifosfati, histamina dhe adrenalina përdoren më në mënyrë implicite si rregullatorë të aktivizimit të trombociteve dhe trombozës.Më e rëndësishmja, shumë nga këta elementë kanë funksionin e modifikimit të qelizave imune.ADP e trombociteve njihet nga receptori P2Y12ADP në qelizat dendritike (DC), duke rritur kështu endocitozën e antigjenit.DC (qeliza prezantuese e antigjenit) është shumë e rëndësishme për fillimin e përgjigjes imune të qelizave T dhe kontrollin e përgjigjes imune mbrojtëse, e cila lidh sistemin imunitar të lindur dhe sistemin imunitar adaptiv.Përveç kësaj, adenozina trifosfati i trombociteve (ATP) dërgon sinjale përmes receptorit të qelizave T P2X7, duke çuar në rritjen e diferencimit të qelizave ndihmëse CD4 T në qeliza T ndihmëse 17 (Th17) proinflamatore.Komponentë të tjerë të granulave të dendura të trombociteve (të tilla si glutamati dhe serotonina) nxisin migrimin e qelizave T dhe rrisin përkatësisht diferencimin e monociteve në DC.Në PRP, këta imunomodulatorë që rrjedhin nga grimcat e dendura janë shumë të pasuruara dhe kanë funksione të konsiderueshme imune.
Numri i ndërveprimeve të mundshme direkte dhe indirekte ndërmjet trombociteve dhe qelizave të tjera (receptore) është i gjerë.Prandaj, aplikimi i PRP në mjedisin lokal të indit patologjik mund të shkaktojë një sërë efektesh inflamatore.
Përqendrimi i trombociteve
C-PRP duhet të përmbajë doza klinike të trombociteve të koncentruara për të prodhuar efekte të dobishme terapeutike.Trombocitet në C-PRP duhet të stimulojnë proliferimin qelizor, sintezën e faktorëve mezenkimalë dhe neurotrofikë, të nxisin migrimin e qelizave kemotaktike dhe të stimulojnë aktivitetin imunrregullues, siç tregohet në figurë.
Trombocitet e aktivizuara, çlirimi i PGF dhe molekulave të ngjitjes ndërmjetësojnë një sërë ndërveprimesh qelizore: kemotaksën, ngjitjen e qelizave, migrimin dhe diferencimin e qelizave, dhe rregullojnë aktivitetet rregulluese imune.Këto ndërveprime qelizë-qelizë trombocitare kontribuojnë në angiogjenezën dhe aktivitetin inflamator dhe në fund të fundit stimulojnë procesin e riparimit të indeve.Shkurtesat: BMA: aspirat i palcës së eshtrave, EPC: qeliza progenitore endoteliale, EC: qeliza endoteliale, 5-HT: 5-hidroksitriptaminë, RANTES: rregullimi i aktivizuar i shprehjes normale të qelizave T dhe sekretimit të supozuar, JAM: tipi i molekulës ngjitëse të bashkimit, CD40L: 40 ligand, SDF-1 α: Faktori-1 α i rrjedhur nga qeliza stromale, CXCL: ligandi i kemokinës (motivi CXC), PF4: faktori trombocitar 4. Përshtatur nga Everts et al.
Marksi ishte personi i parë që vërtetoi se shërimi i kockave dhe indeve të buta ishte përmirësuar dhe numri minimal i trombociteve ishte 1 × 10 6 /µL. 1.3 × Në 106 trombocite/µL, ky studim tregoi më shumë shkrirje.Përveç kësaj, Giusti et al.Zbuluar 1,5 × Mekanizmi i riparimit të indeve në një dozë prej 109 kërkon trombocitet/mL për të nxitur angiogjenezën funksionale nëpërmjet aktivitetit të qelizave endoteliale.Në studimin e fundit, përqendrimet më të larta reduktuan potencialin e angiogjenezës së trombociteve brenda dhe rreth folikulave.Përveç kësaj, të dhënat e mëparshme treguan se doza e PRP do të ndikonte gjithashtu në rezultatet e trajtimit.Prandaj, për të nxitur ndjeshëm reaksionin e angiogjenezës dhe për të stimuluar proliferimin e qelizave dhe migrimin e qelizave, C-PRP duhet të përmbajë të paktën 7.5 në një shishe 5 ml trajtimi PRP × 10 9 mund të japë trombocitet.
Përveç varësisë nga doza, efekti i PRP në aktivitetin e qelizave duket të jetë shumë i varur nga koha.Sophie et al.Këto rezultate sugjerojnë që ekspozimi afatshkurtër ndaj lizave të trombociteve njerëzore mund të stimulojë proliferimin e qelizave kockore dhe kemotaksinë.Përkundrazi, ekspozimi afatgjatë ndaj PRP do të çojë në nivele më të ulëta të fosfatazës alkaline dhe formimit të mineraleve.
Qelizat e kuqe të gjakut
Qelizat e kuqe të gjakut janë përgjegjëse për transportimin e oksigjenit në inde dhe transferimin e dioksidit të karbonit nga indet në mushkëri.Ata nuk kanë bërthamë dhe përbëhen nga molekula heme që lidhen me proteinat.Përbërësit e hekurit dhe hemit në qelizat e kuqe të gjakut nxisin kombinimin e oksigjenit dhe dioksidit të karbonit.Në përgjithësi, cikli jetësor i rruazave të kuqe të gjakut është rreth 120 ditë.Ato hiqen nga qarkullimi nga makrofagët përmes një procesi të quajtur plakja e RBC.Qelizat e kuqe të gjakut në mostrat e PRP mund të dëmtohen në kushte prerjeje (për shembull, operacioni i gjakderdhjes nga gjaku i plotë, procesi i ndërmjetësuar nga imuniteti, stresi oksidativ ose skema joadekuate e përqendrimit të PRP).Prandaj, membrana e qelizave RBC zbërthehet dhe çliron hemoglobinën toksike (Hb), e matur me hemoglobinën pa plazma (PFH), hemin dhe hekurin.].PFH dhe produktet e tij të degradimit (hemi dhe hekuri) së bashku çojnë në efekte të dëmshme dhe citotoksike në inde, duke çuar në stres oksidativ, humbje të oksidit nitrik, aktivizimin e rrugëve inflamatore dhe imunosupresion.Këto efekte përfundimisht do të çojnë në mosfunksionim të mikroqarkullimit, vazokonstriksion lokal dhe lëndim vaskular, si dhe dëmtime serioze të indeve.
Gjëja më e rëndësishme është se kur RBC që përmban C-PRP shpërndahet në inde, ai do të shkaktojë një reaksion lokal të quajtur eriptozë, i cili do të shkaktojë lirimin e një frenuesi efektiv të citokinës dhe migrimit të makrofagëve.Kjo citokinë pengon migrimin e monociteve dhe makrofagëve.Ushtron sinjale të forta pro-inflamatore në indet përreth, pengon migrimin e qelizave staminale dhe përhapjen e fibroblasteve dhe çon në mosfunksionim të rëndësishëm lokal të qelizave.Prandaj, është e rëndësishme të kufizohet kontaminimi i RBC në përgatitjet PRP.Për më tepër, roli i qelizave të kuqe të gjakut në rigjenerimin e indeve nuk është përcaktuar kurrë.Centrifugimi adekuat i C-PRP dhe procesi i përgatitjes zakonisht do të zvogëlojë ose madje eliminojë praninë e qelizave të kuqe të gjakut, duke shmangur kështu pasojat negative të hemolizës dhe policitemisë.
Leukocitet në C-PRP
Prania e qelizave të bardha të gjakut në preparatet PRP varet nga pajisjet e trajtimit dhe skema e përgatitjes.Në pajisjet PRP me bazë plazma, qelizat e bardha të gjakut eliminohen plotësisht;Megjithatë, qelizat e bardha të gjakut u përqendruan ndjeshëm në përgatitjen PRP të shtresës kafe të sedimentimit të eritrociteve.Për shkak të mekanizmave të tij mbrojtës imunitar dhe pritës, qelizat e bardha të gjakut ndikojnë shumë në biologjinë e brendshme të kushteve akute dhe kronike të indeve.Këto karakteristika do të diskutohen më tej më poshtë.Prandaj, prania e leukociteve specifike në C-PRP mund të shkaktojë efekte të rëndësishme qelizore dhe indore.Më konkretisht, sisteme të ndryshme të shtresës kafe-verdhë të sedimentimit të eritrociteve PRP përdorin skema të ndryshme përgatitjeje, duke prodhuar kështu përqindje të ndryshme të neutrofileve, limfociteve dhe monociteve në PRP.Eozinofilet dhe bazofilet nuk mund të maten në preparatet PRP sepse membranat e tyre qelizore janë shumë të brishta për t'i bërë ballë forcave të përpunimit centrifugale.
Neutrofilet
Neutrofilet janë leukocite thelbësore në shumë rrugë shëruese.Këto rrugë kombinohen me proteinat antimikrobike të pranishme në trombocitet për të formuar një pengesë të dendur kundër patogjenëve invazivë.Ekzistenca e neutrofileve përcaktohet sipas objektivit të trajtimit të C-PRP.Rritja e niveleve të inflamacionit të indeve mund të kërkohet në bioterapinë PRP të kujdesit kronik të plagës ose në aplikimet që synojnë rritjen ose shërimin e kockave.E rëndësishmja, funksionet shtesë të neutrofileve janë gjetur në disa modele, duke theksuar rolin e tyre në angiogjenezën dhe riparimin e indeve.Megjithatë, neutrofilet mund të shkaktojnë edhe efekte të dëmshme, kështu që ato nuk janë të përshtatshme për disa aplikime.Zhou dhe Wang vërtetuan se përdorimi i PRP i pasur me neutrofile mund të çojë në një rritje të raportit të kolagjenit të tipit III ndaj kolagjenit të tipit I, duke përkeqësuar kështu fibrozën dhe duke reduktuar forcën e tendinit.Karakteristika të tjera të dëmshme të ndërmjetësuara nga neutrofilet janë çlirimi i citokinave inflamatore dhe metalloproteinazave të matricës (MMPs), të cilat mund të nxisin inflamacionin dhe katabolizmin kur aplikohen në inde.
Leukomonocitet
Në C-PRP, limfocitet mononukleare T dhe B janë më të përqendruara se çdo qelizë tjetër e bardhë e gjakut.Ato janë të lidhura ngushtë me imunitetin adaptiv citotoksik të ndërmjetësuar nga qeliza.Limfocitet mund të shkaktojnë reaksione qelizore për të luftuar infeksionin dhe për t'u përshtatur me pushtuesit.Përveç kësaj, citokinat me prejardhje nga limfocitet T (interferon-γ [IFN-γ] dhe interleukina-4 (IL-4) rrisin polarizimin e makrofagëve. Verassar et al. Është vërtetuar se limfocitet T konvencionale mund të nxisin në mënyrë indirekte shërimin e indeve në modeli i miut duke rregulluar diferencimin e monociteve dhe makrofagëve.
Monocit - qelizë riparuese multipotente
Sipas pajisjes për përgatitjen PRP të përdorur, monocitet mund të dalin ose të mos ekzistojnë në shishen e trajtimit PRP.Fatkeqësisht, performanca e tyre dhe aftësia rigjeneruese diskutohen rrallë në literaturë.Prandaj, pak vëmendje i kushtohet monociteve në metodën e përgatitjes ose formulën përfundimtare.Grupi i monociteve është heterogjen, me origjinë nga qelizat paraardhëse në palcën e eshtrave dhe transportohet në indet periferike përmes rrugës së qelizave staminale hematopoietike sipas stimulimit të mikromjedisit.Gjatë homeostazës dhe inflamacionit, monocitet qarkulluese largohen nga qarkullimi i gjakut dhe rekrutohen në indet e dëmtuara ose të degraduara.Ato mund të veprojnë si makrofagë (M Φ) qeliza efektore ose qeliza paraardhëse.Monocitet, makrofagët dhe qelizat dendritike përfaqësojnë sistemin fagocitar mononuklear (MPS). Një tipar tipik i MPS është plasticiteti i modelit të tij të shprehjes së gjeneve dhe mbivendosja funksionale midis këtyre llojeve të qelizave.Në indet e degjeneruara, makrofagët rezidentë, faktorët e rritjes me veprim lokal, citokinat pro-inflamatore, qelizat apoptotike ose nekrotike dhe produktet mikrobike iniciojnë monocitet që të diferencohen në grupet e qelizave MPS.Supozoni se kur C-PRP që përmban monocite me rendiment të lartë injektohet në mikromjedisin lokal të sëmundjes, monocitet ka të ngjarë të diferencohen në M Φ për të shkaktuar ndryshime të mëdha qelizore.
Nga monociti në M Φ Në procesin e transformimit, Fenotipi M Φ specifik.Në dhjetë vitet e fundit është zhvilluar një model, i cili integron M Φ Mekanizmi kompleks i aktivizimit përshkruhet si polarizimi i dy gjendjeve të kundërta: M Φ Fenotipi 1 (M Φ 1, aktivizimi klasik) dhe M Φ Fenotipi 2 (M Φ). 2, aktivizimi alternativ).M Φ 1 karakterizohet nga sekretimi inflamator i citokinës (IFN-γ) dhe oksidi nitrik për të prodhuar mekanizëm efektiv të vrasjes së patogjenit.M Φ Fenotipi prodhon gjithashtu faktorin e rritjes endoteliale vaskulare (VEGF) dhe faktorin e rritjes fibroblaste (FGF).M Φ Fenotipi përbëhet nga qeliza antiinflamatore me fagocitozë të lartë.M Φ 2 Prodhojnë përbërës të matricës jashtëqelizore, angiogjenezë dhe kemokina, dhe interleukinë 10 (IL-10).Përveç mbrojtjes së patogjenit, M Φ Ai gjithashtu mund të zvogëlojë inflamacionin dhe të nxisë riparimin e indeve.Vlen të përmendet se M Φ 2 është ndarë në M in vitro Φ 2a、M Φ 2b dhe M Φ 2. Kjo varet nga stimuli.Përkthimi in vivo i këtyre nëntipave është i vështirë sepse indi mund të përmbajë grupe të përziera M Φ.Është interesante, bazuar në sinjalet lokale mjedisore dhe nivelet e IL-4, M Φ 1 proinflamatore mund të konvertohet për të nxitur riparimin M Φ 2. Nga këto të dhëna, është e arsyeshme të supozohet se ka përqendrime të larta të monociteve dhe preparateve M Φ C-PRP. mund të kontribuojnë në riparimin më të mirë të indeve, sepse ato kanë aftësi për riparimin e indeve anti-inflamatore dhe transduksion të sinjalit qelizor.
Përkufizimi i hutuar i fraksionit të qelizave të bardha të gjakut në PRP
Prania e qelizave të bardha të gjakut në shishet e trajtimit PRP varet nga pajisja e përgatitjes PRP dhe mund të ketë dallime të rëndësishme.Ka shumë mosmarrëveshje rreth ekzistencës së leukociteve dhe kontributit të tyre në produkte të ndryshme nën-PRP (të tilla si PRGF, P-PRP, LP-PRP, LR-PRP, P-PRF dhe L-PRF) Në një rishikim të kohëve të fundit, gjashtë të rastësishme provat e kontrolluara (niveli i provave 1) dhe tre studime krahasuese prospektive (niveli i provave 2) përfshinin 1055 pacientë, duke treguar se LR-PRP dhe LP-PRP kishin siguri të ngjashme.Autori arriti në përfundimin se reagimi negativ i PRP mund të mos lidhet drejtpërdrejt me përqendrimin e qelizave të bardha të gjakut.Në një studim tjetër, LR-PRP nuk e ndryshoi interleukinën inflamatore (IL-1) në OA të gjurit β, IL-6, IL-8 dhe IL-17).Këto rezultate mbështesin pikëpamjen se roli i leukociteve në aktivitetin biologjik të PRP in vivo mund të vijë nga ndërlidhja midis trombociteve dhe leukociteve.Ky ndërveprim mund të nxisë biosintezën e faktorëve të tjerë (si lipoksigjeni), të cilët mund të kompensojnë ose nxisin regresionin e inflamacionit.Pas çlirimit fillestar të molekulave inflamatore (acidi aracidonic, leukotriene dhe prostaglandina), lipoksigjeni A4 lirohet nga trombocitet e aktivizuara për të parandaluar aktivizimin e neutrofileve.Është në këtë mjedis që fenotipi M Φ nga M Φ 1 kalon në M Φ 2. Përveç kësaj, ka prova në rritje që qelizat mononukleare qarkulluese mund të diferencohen në një sërë llojesh qelizash jo-fagocitare për shkak të pluripotencës së tyre.
Lloji i PRP do të ndikojë në kulturën e MSC.Krahasuar me mostrat e pastërta PRP ose PPP, LR-PRP mund të nxisë proliferim dukshëm më të lartë të MSC-ve që rrjedhin nga palca e eshtrave (BMMSC), me çlirim më të shpejtë dhe aktivitet biologjik më të mirë të PGF.Të gjitha këto karakteristika janë të favorshme për të shtuar monocitet në shishen e trajtimit PRP dhe për të njohur aftësinë e tyre imunomoduluese dhe potencialin e diferencimit.
Rregullimi imunitar kongjenital dhe adaptiv i PRP
Funksioni fiziologjik më i famshëm i trombociteve është kontrolli i gjakderdhjes.Ato grumbullohen në vendin e dëmtimit të indeve dhe në enët e gjakut të dëmtuara.Këto ngjarje shkaktohen nga shprehja e integrinave dhe selektinave që stimulojnë ngjitjen dhe grumbullimin e trombociteve.Endoteli i dëmtuar e përkeqëson më tej këtë proces dhe kolagjeni i ekspozuar dhe proteinat e tjera të matricës subendoteliale nxisin aktivizimin e thellë të trombociteve.Në këto raste, është vërtetuar roli i rëndësishëm i ndërveprimit ndërmjet faktorit von Willebrand (vWF) dhe glikoproteinës (GP), veçanërisht GP-Ib.Pas aktivizimit të trombociteve, trombocitet α-、 granula të dendura, lizozome dhe T rregullojnë ekzocitozën dhe lëshojnë përmbajtjen e tyre në mjedisin jashtëqelizor.
Molekula e ngjitjes së trombociteve
Për të kuptuar më mirë rolin e PRP në indet inflamatore dhe trombocitet në përgjigjen imune, duhet të kuptojmë se si receptorët e ndryshëm të sipërfaqes së trombociteve (integrinat) dhe molekulat e ngjitjes së bashkimit (JAM) dhe ndërveprimet qelizore mund të iniciojnë procese kritike në imunitetin e lindur dhe adaptiv.
Integrinat janë molekula ngjitëse të sipërfaqes qelizore që gjenden në lloje të ndryshme qelizash dhe të shprehura në sasi të mëdha në trombocitet.Integrinet përfshijnë a5b1, a6b1, a2b1 LFA-2, (GPIa/IIa) dhe aIIbb3 (GPIIb/IIIa).Zakonisht, ato ekzistojnë në një gjendje statike dhe me afinitet të ulët.Pas aktivizimit, ato kalojnë në gjendjen e afinitetit të lartë të lidhjes së ligandit.Integrinat kanë funksione të ndryshme në trombocitet dhe marrin pjesë në ndërveprimin e trombociteve me disa lloje të qelizave të bardha të gjakut, qelizave endoteliale dhe matricës jashtëqelizore.Përveç kësaj, kompleksi GP-Ib-V-IX shprehet në membranën e trombociteve dhe është receptori kryesor për lidhjen me von vWF.Ky ndërveprim ndërmjetëson kontaktin fillestar midis trombociteve dhe strukturave subendoteliale të ekspozuara.Integrina e trombociteve dhe kompleksi GP janë të lidhura me procese të ndryshme inflamatore dhe luajnë një rol të rëndësishëm në formimin e kompleksit trombocit-leukocitor.Në mënyrë të veçantë, integrina aIIbb3 është e nevojshme për të formuar një kompleks të qëndrueshëm duke kombinuar fibrinogjenin me receptorin e antigjenit të makrofagut 1 (Mac-1) në neutrofile.
Trombocitet, neutrofilet dhe qelizat endoteliale vaskulare shprehin molekula specifike ngjitëse qelizore, të quajtura selektinë.Në kushte inflamatore, trombocitet shprehin P-selectin dhe neutrofil L-selectin.Pas aktivizimit të trombociteve, P-selektina mund të lidhet me ligandin PSGL-1 që ekziston në neutrofile dhe monocite.Për më tepër, lidhja e PSGL-1 fillon reaksionin e kaskadës së sinjalit ndërqelizor, i cili aktivizon neutrofilet përmes integrinës së neutrofileve Mac-1 dhe antigjenit 1 të lidhur me funksionin limfocitar (LFA-1).Mac-1 i aktivizuar lidhet me GPIb ose GPIIb/IIIa në trombocitet nëpërmjet fibrinogjenit, duke stabilizuar kështu ndërveprimin midis neutrofileve dhe trombociteve.Përveç kësaj, LFA-1 i aktivizuar mund të kombinohet me molekulën 2 të ngjitjes ndërqelizore të trombociteve për të stabilizuar më tej kompleksin neutrofil-trombocitar për të nxitur ngjitjen afatgjatë me qelizat.
Trombocitet dhe leukocitet luajnë një rol kyç në përgjigjet imune të lindura dhe adaptive
Trupi mund të njohë trupat e huaj dhe indet e dëmtuara në sëmundjet akute ose kronike për të filluar reaksionin kaskadë të shërimit të plagëve dhe rrugën inflamatore.Sistemet imunitare të lindura dhe adaptive mbrojnë bujtësin nga infeksioni dhe qelizat e bardha të gjakut luajnë një rol të rëndësishëm në mbivendosjen midis dy sistemeve.Në mënyrë të veçantë, monocitet, makrofagët, neutrofilet dhe qelizat vrasëse natyrore luajnë një rol kyç në sistemin e lindur, ndërsa limfocitet dhe nëngrupet e tyre luajnë një rol të ngjashëm në sistemin imunitar adaptiv.
Ndërveprimet e trombociteve dhe leukociteve në ndërveprimet e lindura të qelizave imune.Trombocitet ndërveprojnë me neutrofilet dhe monocitet, dhe në fund me M Φ Ndërveprojnë, rregullojnë dhe rrisin funksionet e tyre efektore.Këto ndërveprime trombocite-leukocite çojnë në inflamacion përmes mekanizmave të ndryshëm, duke përfshirë NETosis.Shkurtesat: MPO: mieloperoksidaza, ROS: specie reaktive e oksigjenit, TF: faktor indor, NET: kurthi jashtëqelizor i neutrofileve, NF-κ B: Faktori bërthamor kappa B, M Φ: Makrofagët.
Sistemi imunitar i lindur
Roli i sistemit imunitar të lindur është të identifikojë mikroorganizmat invazivë ose fragmentet e indeve jo specifike dhe të stimulojë pastrimin e tyre.Kur struktura të caktuara molekulare të quajtura receptorë të njohjes së modelit të shprehjes së sipërfaqes (PRRs) kombinohen me modelet molekulare të lidhura me patogjenin dhe modelet molekulare të lidhura me dëmtimin, sistemi imunitar i lindur do të aktivizohet.Ka shumë lloje të PRR-ve, duke përfshirë receptorët e ngjashëm me Toll (TLR) dhe receptorët e ngjashëm me RIG-1 (RLR).Këta receptorë mund të aktivizojnë faktorin kryesor të transkriptimit kappa B (NF-κ B) Ai gjithashtu rregullon aspekte të shumta të përgjigjes imune të lindur dhe adaptive.Është interesante se trombocitet shprehin gjithashtu një shumëllojshmëri të molekulave të receptorit imunrregullues në sipërfaqen dhe citoplazmën e tyre, si p-selektina, ligandi i proteinës transmembranore CD40 (CD40L), citokinat (si IL-1 β, TGF-β) dhe TLR specifike për trombocitet. Prandaj, trombocitet mund të ndërveprojnë me qeliza të ndryshme imune.
Ndërveprimi i trombociteve-qelizës së bardhë në imunitetin e lindur
Kur trombocitet hyjnë ose pushtojnë rrjedhën e gjakut ose indin, trombocitet janë një nga qelizat që zbulojnë së pari dëmtimet endoteliale dhe patogjenët mikrobikë.Grumbullimi i trombociteve dhe promovimi i çlirimit të agonistëve të trombociteve ADP, trombinës dhe vWF, duke rezultuar në aktivizimin e trombociteve dhe shprehjen e receptorëve të kemokinës së trombociteve C, CC, CXC dhe CX3C, duke shkaktuar kështu trombocitet në vendin e infektuar ose lëndim.
Sistemi imunitar i lindur është gjenetikisht i paracaktuar për të zbuluar pushtuesit, si viruset, bakteret, parazitët dhe toksinat, ose plagët dhe plagët e indeve.Është një sistem jospecifik, sepse çdo patogjen do të identifikohet si i huaj ose jo-vetë dhe do të lokalizohet shpejt.Sistemi imunitar i lindur mbështetet në një grup proteinash dhe fagocitesh, të cilat njohin karakteristikat e ruajtura mirë të patogjenëve dhe aktivizojnë shpejt përgjigjen imune për të ndihmuar në eliminimin e pushtuesve, edhe nëse strehuesi nuk ka qenë kurrë i ekspozuar ndaj patogjenëve specifikë më parë.
Neutrofilet, monocitet dhe qelizat dendritike janë qelizat imune më të zakonshme të lindura në gjak.Rekrutimi i tyre është i nevojshëm për një përgjigje adekuate të hershme imune.Kur PRP përdoret në mjekësinë rigjeneruese, ndërveprimi i trombociteve-qelizave të bardha rregullon inflamacionin, shërimin e plagëve dhe riparimin e indeve.TLR-4 në trombocitet stimulon ndërveprimin trombocit-neutrofil, i cili rregullon të ashtuquajturin shpërthim oksidativ të leukociteve duke rregulluar çlirimin e specieve reaktive të oksigjenit (ROS) dhe mieloperoksidazës (MPO) nga neutrofilet.Përveç kësaj, ndërveprimi midis trombociteve-neutrofileve dhe degranulimit të neutrofileve çon në formimin e kurtheve neutrofile-ekstraqelizore (NETs).NET-të përbëhen nga bërthama neutrofile dhe përmbajtje të tjera ndërqelizore neutrofile, të cilat mund të kapin bakteret dhe t'i vrasin ato përmes NETosis.Formimi i NETs është një mekanizëm thelbësor i vrasjes së neutrofileve.
Pas aktivizimit të trombociteve, monocitet mund të migrojnë në indet e sëmura dhe degjeneruese, ku kryejnë aktivitet ngjitës dhe sekretojnë molekula inflamatore që mund të ndryshojnë kemotaksën dhe vetitë proteolitike.Përveç kësaj, trombocitet mund të nxisin aktivizimin e monocitit NF-κ B për të rregulluar funksionin efektor të monociteve, i cili është ndërmjetësi kryesor i përgjigjes inflamatore dhe aktivizimit dhe diferencimit të qelizave imune.Trombocitet nxisin më tej shpërthimin oksidativ endogjen të monociteve për të nxitur shkatërrimin e patogjenëve fagocitarë.Lëshimi i MPO ndërmjetësohet nga ndërveprimi i drejtpërdrejtë midis trombociteve-monocit CD40L-MAC-1.Është interesante se kur P-selektina aktivizon trombocitet në kushte inde inflamatore akute dhe kronike, kemokinat me prejardhje nga trombocitet PF4, RANTES, IL-1 β dhe CXCL-12 mund të parandalojnë apoptozën spontane të monociteve, por të nxisin diferencimin e tyre në makrofagë.
Sistemi imunitar adaptiv
Pasi sistemi imunitar i lindur jo-specifik të njohë dëmtimin mikrobial ose të indeve, sistemi imunitar specifik adaptiv do të marrë përsipër.Sistemet adaptive përfshijnë limfocitet B që lidhen me antigjenin (qelizat B) dhe limfocitet T konvencionale (Treg) që koordinojnë pastrimin e patogjenëve.Qelizat T mund të ndahen përafërsisht në qeliza T ndihmëse (qelizat Th) dhe qelizat T citotoksike (qelizat Tc, të njohura gjithashtu si qelizat T vrasëse).Qelizat Th ndahen më tej në qeliza Th1, Th2 dhe Th17, të cilat kanë funksione kyçe në inflamacion.Qelizat Th mund të sekretojnë citokina proinflamatore (p.sh. IFN-γ, TNF-β) dhe disa interleukina (p.sh. IL-17). Ato janë veçanërisht efektive në parandalimin e virusit ndërqelizor dhe infeksionit bakterial. Qelizat Th stimulojnë përhapjen dhe diferencimin e qelizave të përfshira në Përgjigja imune Qelizat Tc janë qeliza efektore, të cilat mund të eliminojnë mikroorganizmat dhe qelizat e synuara ndërqelizore dhe jashtëqelizore.
Interesante është se qelizat Th2 prodhojnë IL-4 dhe ndikojnë në polarizimin M Φ, M Φ Rigjenerimin e drejtuar fenotipin M Φ 2, ndërsa IFN- γ M Φ Ndryshon në fenotip M Φ 1 inflamator, që varet nga doza dhe koha e citokineve.Pasi aktivizohet IL-4, M Φ 2 nxit qelizat Treg të diferencohen në qeliza Th2 dhe më pas prodhon IL-4 shtesë (lak i reagimit pozitiv).Qelizat Th konvertojnë M Φ Fenotipi drejtohet te fenotipi rigjenerues në përgjigje të agjentëve biologjikë me origjinë indore.Ky mekanizëm bazohet në provat se qelizat Th luajnë një rol të rëndësishëm në kontrollin e inflamacionit dhe riparimin e indeve.
Ndërveprimi i trombociteve-qelizës së bardhë në imunitetin adaptiv
Sistemi imunitar adaptiv përdor receptorët specifikë të antigjenit dhe kujton patogjenët e hasur më parë dhe i shkatërron ata kur më pas takon bujtësin.Megjithatë, këto përgjigje imune adaptive u zhvilluan ngadalë.Konias etj.Ajo tregon se komponenti i trombociteve kontribuon në perceptimin e rrezikut dhe riparimin e indeve, dhe se ndërveprimi midis trombociteve dhe leukociteve promovon aktivizimin e përgjigjes imune adaptive.
Gjatë përgjigjes imune adaptive, trombocitet nxisin përgjigjet e monociteve dhe makrofagëve përmes maturimit të qelizave DC dhe NK, duke çuar në përgjigje specifike të qelizave T dhe B.Prandaj, përbërësit e granulës së trombociteve ndikojnë drejtpërdrejt në imunitetin adaptiv duke shprehur CD40L, një molekulë që është thelbësore për rregullimin e përgjigjes imune adaptive.Trombocitet përmes CD40L jo vetëm që luajnë një rol në paraqitjen e antigjenit, por gjithashtu ndikojnë në reagimin e qelizave T.Liu et al.U zbulua se trombocitet rregullojnë përgjigjen e qelizave T CD4 në një mënyrë komplekse.Ky rregullim diferencial i nëngrupeve të qelizave CD4 T do të thotë që trombocitet nxisin qelizat T CD4 për t'iu përgjigjur stimujve inflamatorë, duke prodhuar kështu përgjigje të forta pro-inflamatore dhe anti-inflamatore.
Trombocitet gjithashtu rregullojnë përgjigjen adaptive të ndërmjetësuara nga qeliza B ndaj patogjenëve mikrobikë.Dihet mirë se CD40L në qelizat CD4 T të aktivizuara do të shkaktojë CD40 të qelizave B, duke siguruar sinjalin e dytë të nevojshëm për aktivizimin e limfociteve B të varur nga qelizat T, konvertimin e mëvonshëm të aliotipit dhe diferencimin dhe përhapjen e qelizave B.Në përgjithësi, rezultatet tregojnë qartë funksionet e ndryshme të trombociteve në imunitetin adaptiv, duke treguar se trombocitet lidhin ndërveprimin midis qelizave T dhe qelizave B përmes CD40-CD40L, duke rritur kështu përgjigjen e qelizave B të varur nga qelizat T.Për më tepër, trombocitet janë të pasura me receptorë të sipërfaqes qelizore, të cilët mund të nxisin aktivizimin e trombociteve dhe të çlirojnë një numër të madh molekulash aktive inflamatore dhe biologjike të ruajtura në grimca të ndryshme trombocite, duke ndikuar kështu në përgjigjen imune të lindur dhe adaptive.
Roli i zgjeruar i serotoninës me prejardhje nga trombocitet në PRP
Serotonina (5-hidroksitriptamina, 5-HT) ka një rol të qartë kyç në sistemin nervor qendror (CNS), duke përfshirë tolerancën ndaj dhimbjes.Është vlerësuar se pjesa më e madhe e 5-HT-së njerëzore prodhohet në traktin gastrointestinal dhe më pas përmes qarkullimit të gjakut, ku absorbohet nga trombocitet përmes transportuesit të rimarrjes së serotoninës dhe ruhet në grimca të dendura në përqendrim të lartë (65 mmol/L).5-HT është një neurotransmetues dhe hormon i njohur që ndihmon në rregullimin e proceseve të ndryshme neuropsikologjike në SNQ (5-HT qendrore).Megjithatë, pjesa më e madhe e 5-HT ekziston jashtë SNQ (5-HT periferike), dhe është i përfshirë në rregullimin e funksioneve biologjike sistemike dhe qelizore të sistemeve të shumëfishta të organeve, duke përfshirë sistemet funksionale kardiovaskulare, mushkërive, gastrointestinale, urogjenitale dhe trombociteve.5-HT ka metabolizëm të varur nga përqendrimi në një sërë llojesh qelizash, duke përfshirë adipocitet, qelizat epiteliale dhe qelizat e bardha të gjakut.5-HT periferik është gjithashtu një modulator i fuqishëm imunitar, i cili mund të stimulojë ose frenojë inflamacionin dhe të ndikojë në qeliza të ndryshme imune përmes receptorit të tij specifik 5-HT (5HTR).
Mekanizmi parakrin dhe autokrin i HT
Aktiviteti i 5-HT ndërmjetësohet nga ndërveprimi i tij me 5HTRs, e cila është një superfamilje me shtatë anëtarë (5-HT 1 – 7) dhe të paktën 14 nëntipe të ndryshme receptori, duke përfshirë anëtarin e zbuluar së fundmi 5-HT 7, periferik dhe funksion në menaxhimin e dhimbjes.Në procesin e degranulimit të trombociteve, trombocitet e aktivizuara sekretojnë një numër të madh të 5-HT me prejardhje nga trombocitet, të cilat mund të nxisin tkurrjen vaskulare dhe stimulojnë aktivizimin e trombociteve dhe limfociteve ngjitur nëpërmjet shprehjes së 5-HTR në qelizat endoteliale, qelizat e muskujve të lëmuar dhe qelizat imune.Pacala etj.U studiua efekti mitotik i 5-HT në qelizat endoteliale vaskulare dhe u përcaktua potenciali i nxitjes së rritjes së enëve të gjakut të dëmtuara duke stimuluar angiogjenezën.Mënyra se si rregullohen këto procese nuk është plotësisht e qartë, por mund të përfshijë rrugë diferenciale të sinjalit të dyanshëm në mikroqarkun e indeve për të rregulluar funksionet e qelizave endoteliale vaskulare dhe qelizave të muskujve të lëmuar, fibroblasteve dhe qelizave imune përmes receptorëve specifikë 5-HT në këto qeliza. .Funksioni autokrin i trombociteve 5-HT pas aktivizimit të trombociteve është përshkruar [REF].Lëshimi i 5-HT rrit aktivizimin e trombociteve dhe rekrutimin e trombociteve qarkulluese, duke çuar në aktivizimin e reaksioneve të kaskadës së sinjalit dhe efektorëve në rrjedhën e sipërme që mbështesin reaktivitetin e trombociteve.
Efekti imunomodulues 5-HT
Gjithnjë e më shumë prova tregojnë se serotonina mund të luajë një rol në 5HTR të ndryshëm si një modulator imunitar.Sipas 5HTR të shprehur në leukocite të ndryshme të përfshirë në reaksionin inflamator, 5-HT me prejardhje nga trombocitet vepron si një rregullator imunitar si në sistemin imunitar të lindur ashtu edhe në atë adaptiv.5-HT mund të stimulojë përhapjen e Treg dhe të rregullojë funksionet e qelizave B, qelizave vrasëse natyrore dhe neutrofileve duke rekrutuar DC dhe monocitet në zonën inflamatore.Studimet e fundit kanë treguar se 5-HT që rrjedh nga trombocitet mund të rregullojë funksionin e qelizave imune në kushte specifike.Prandaj, duke përdorur C-PRP, përqendrimi i trombociteve është më i madh se 1 × 10 6/µL mund të ndihmojë ndjeshëm në transportimin e përqendrimit të 5-HT që rrjedh nga trombocitet e mëdha në inde.Në mikromjedisin e karakterizuar nga komponentë inflamatorë, PRP mund të ndërveprojë me disa qeliza imune që luajnë një rol kyç në këto patologji, të cilat mund të ndikojnë në rezultatet klinike.
Figura që shfaq përgjigjen e shumëanshme 5-HT pas aktivizimit të trombociteve inflamatore PRP.Pas aktivizimit të trombociteve, trombocitet lëshojnë granula të tyre, duke përfshirë 5-HT në granula të dendura, e cila ka një gamë të gjerë efektesh diferenciale në qelizat e ndryshme imune, qelizat endoteliale dhe qelizat e muskujve të lëmuar.Shkurtesat: SMC: qelizat e muskujve të lëmuar, EC: qelizat endoteliale, Treg: limfocitet T konvencionale, M Φ: Makrofagët, DC: qelizat dendritike, IL: interleukina, IFN-γ: Interferon γ. Modifikuar dhe përshtatur nga Everts et al.dhe Hull et al.
Efekti analgjezik i PRP
Trombocitet e aktivizuara do të lëshojnë shumë ndërmjetës pro-inflamator dhe anti-inflamator, të cilët jo vetëm që mund të shkaktojnë dhimbje, por edhe të zvogëlojnë inflamacionin dhe dhimbjen.Pasi të aplikohet, dinamika tipike e trombociteve të PRP ndryshon mikromjedisin përpara riparimit dhe rigjenerimit të indeve përmes një sërë rrugësh komplekse që lidhen me anabolizmin dhe katabolizmin, përhapjen e qelizave, diferencimin dhe rregullimin e qelizave burimore.Këto karakteristika të PRP çojnë në aplikimin e PRP në kushte të ndryshme klinike patologjike të shoqëruara zakonisht me dhimbje kronike (si lëndime sportive, sëmundje ortopedike, sëmundje të shtyllës kurrizore dhe plagë kronike komplekse), megjithëse mekanizmi i saktë nuk është përcaktuar plotësisht.
Në vitin 2008, Evertz et al.Është prova e parë e kontrolluar e rastësishme që raporton efektin analgjezik të preparatit PRP, i cili përgatitet nga shtresa kafe e shkallës së sedimentimit autolog të eritrociteve dhe aktivizohet me trombinë autologe pas operacionit në shpatull.Ata vunë në dukje një reduktim të ndjeshëm në rezultatet e shkallës analoge vizuale, përdorimin e analgjezikëve me bazë opioidet dhe rehabilitimin më të suksesshëm pas operacionit.Vlen të përmendet se ato pasqyrojnë efektin analgjezik të trombociteve të aktivizuara dhe spekulojnë mbi mekanizmin e trombociteve që çlirojnë 5-HT.Me pak fjalë, trombocitet janë të fjetura në PRP të sapopërgatitur.Pas aktivizimit të trombociteve në mënyrë të drejtpërdrejtë ose të tërthortë (faktori i indeve), trombocitet ndryshojnë formën dhe prodhojnë mjaft të rreme për të nxitur grumbullimin e trombociteve.Më pas, ato lëshojnë grimca α- dhe të dendura ndërqelizore.Indi i trajtuar me PRP të aktivizuar do të pushtohet nga PGF, citokinat dhe lizozomet e tjera të trombociteve.Më konkretisht, kur grimcat e dendura lëshojnë përmbajtjen e tyre, ato do të lëshojnë një sasi të madhe të 5-HT që rregullon dhimbjen.Në C-PRP, përqendrimi i trombociteve është 5 deri në 7 herë më i lartë se ai në gjakun periferik.Prandaj, çlirimi i 5-HT nga trombocitet është astronomik.Është interesante se Sprott et al.Raporti vuri re se dhimbja u lehtësua ndjeshëm pas akupunkturës dhe moxibustionit, përqendrimi i 5-HT që rrjedh nga trombocitet u ul ndjeshëm dhe më pas niveli i 5-HT plazmatik u rrit.
Në pjesën periferike, trombocitet, mastocitet dhe qelizat endoteliale do të lëshojnë 5-HT endogjene gjatë dëmtimit të indeve ose traumave kirurgjikale.Është interesante se një shumëllojshmëri e receptorëve 5-HT të neuroneve u zbuluan në zonën periferike, të cilat konfirmuan se 5-HT mund të ndërhyjë në transmetimin nociceptiv në zonën periferike.Këto studime tregojnë se 5-HT mund të ndikojë në transmetimin nociceptiv të indeve periferike përmes receptorëve 5-HT1, 5-HT2, 5-HT3, 5-HT4 dhe 5-HT7.
Sistemi 5-HT përfaqëson një sistem të fuqishëm që mund të zvogëlojë dhe rrisë shkallën e dhimbjes pas stimulimit të dëmshëm.Rregullimi qendror dhe periferik i sinjaleve nociceptive dhe ndryshimet në sistemin 5-HT janë raportuar në pacientët me dhimbje kronike.Vitet e fundit, një numër i madh studimesh janë fokusuar në rolin e 5-HT dhe receptorëve të tij përkatës në përpunimin dhe rregullimin e informacionit të dëmshëm, duke rezultuar në barna të tilla si frenuesit selektiv të rimarrjes së serotoninës (SSRI).Ky medikament pengon rimarrjen e serotoninës në neuronet presinaptike pas çlirimit të serotoninës.Ndikon në kohëzgjatjen dhe intensitetin e komunikimit të serotoninës dhe është një trajtim alternativ për dhimbjet kronike.Nevojiten kërkime të mëtejshme klinike për të kuptuar qartë mekanizmin molekular të rregullimit të dhimbjes 5-HT të rrjedhur nga PRP në sëmundjet kronike dhe degjenerative.
Të dhëna të tjera për të zgjidhur efektin e mundshëm analgjezik të PRP mund të merren pas testit të modelit analgjezik të kafshëve.Përfundimet statistikore krahasuese në këto modele janë sfiduese sepse këto studime përmbajnë shumë variabla.Megjithatë, disa studime klinike kanë trajtuar efektet nociceptive dhe analgjezike të PRP.Disa studime kanë treguar se pacientët që marrin trajtim për tendinozën ose këputjet e manshetës rrotulluese kanë pak lehtësim dhimbjeje.Në të kundërt, disa studime të tjera kanë treguar se PRP mund të zvogëlojë ose edhe të eliminojë dhimbjen e pacientëve me degjenerim të tendinit, OA, fasciit plantar dhe sëmundje të tjera të këmbës dhe kyçit të këmbës.Përqendrimi përfundimtar i trombociteve dhe përbërja biologjike e qelizave janë identifikuar si karakteristikat kryesore të PRP, të cilat ndihmojnë për të vëzhguar efektin e qëndrueshëm analgjezik pas aplikimit të PRP.Variabla të tjerë përfshijnë metodën e dhënies së PRP, teknologjinë e aplikimit, protokollin e aktivizimit të trombociteve, nivelin e aktivitetit biologjik të PGF dhe citokinave të çliruara, llojin e indeve të aplikimit të PRP dhe llojin e dëmtimit.
Vlen të përmendet se Kuffler zgjidhi potencialin e PRP në zbutjen e dhimbjes në pacientët me dhimbje kronike të lehta deri të rënda, dytësore ndaj nervit jo-rigjenerues të dëmtuar.Qëllimi i këtij studimi është të hetojë nëse dhimbja neuropatike mund të zvogëlohet ose të qetësohet për shkak të PRP që promovon rigjenerimin aksonal dhe riinervimin e nervit të synuar.Çuditërisht, midis pacientëve që marrin trajtim, dhimbja neuropatike ende eliminohet ose lehtësohet të paktën gjashtë vjet pas operacionit.Përveç kësaj, të gjithë pacientët filluan të lehtësojnë dhimbjen brenda tre javësh pas aplikimit të PRP.
Kohët e fundit, efekte të ngjashme analgjezike PRP janë vërejtur në fushën e kujdesit të plagëve postoperative dhe lëkurës.Është interesante se autorët raportuan aspektet fiziologjike të dhimbjes së plagës të lidhur me dëmtimin vaskular dhe hipoksinë e indeve të lëkurës.Ata diskutuan gjithashtu rëndësinë e angiogjenezës në optimizimin e oksigjenimit dhe shpërndarjes së lëndëve ushqyese.Studimi i tyre tregoi se krahasuar me grupin e kontrollit, pacientët që merrnin trajtim PRP kishin më pak dhimbje dhe rritje të konsiderueshme të angiogjenezës.Më në fund, Johal dhe kolegët e tij kryen një rishikim sistematik dhe meta-analizë dhe arritën në përfundimin se PRP mund të zvogëlojë dhimbjen pas përdorimit të PRP në indikacione ortopedike, veçanërisht në pacientët që marrin trajtim të epikondilitit të jashtëm dhe OA të gjurit.Fatkeqësisht, ky studim nuk specifikoi efektet e qelizave të bardha të gjakut, përqendrimin e trombociteve ose përdorimin e aktivizuesve ekzogjenë të trombociteve, sepse këto variabla do të ndikonin në efektivitetin e përgjithshëm të PRP.Përqendrimi optimal i trombociteve PRP për lehtësimin maksimal të dhimbjes është i paqartë.Në modelin e tendinozës së miut, përqendrimi i trombociteve ishte 1.0 × 10 6 / μ në L, dhimbja mund të lehtësohet plotësisht, ndërsa lehtësimi i dhimbjes i shkaktuar nga PRP me gjysmën e përqendrimit të trombociteve është ulur ndjeshëm.Prandaj, ne inkurajojmë më shumë studime klinike për të hetuar efektet analgjezike të preparateve të ndryshme PRP.
PRP dhe efekti i angiogjenezës
Përgatitjet C-PRP në mjekësinë rigjeneruese precize lejojnë shpërndarjen e biomolekulave të çliruara nga përqendrimet e larta të trombociteve të aktivizuara në zonat e indeve të synuara.Prandaj, janë nisur një sërë reaksionesh kaskadë, të cilat kontribuojnë në rregullimin imunitar në vend, procesin inflamator dhe angiogjenezën për të nxitur shërimin dhe riparimin e indeve.
Angiogjeneza është një proces dinamik me shumë hapa që përfshin mbirjen dhe mikroenët e indeve nga enët para-ekzistuese të gjakut.Angiogjeneza ka përparuar për shkak të një sërë mekanizmash biologjikë, duke përfshirë migrimin, proliferimin, diferencimin dhe ndarjen e qelizave endoteliale.Këto procese qelizore janë parakushte për formimin e enëve të reja të gjakut.Ato janë thelbësore për rritjen e enëve të gjakut paraekzistuese për të rivendosur rrjedhën e gjakut dhe për të mbështetur aktivitetin e lartë metabolik të riparimit të indeve dhe rigjenerimit të indeve.Këto enë të reja gjaku lejojnë shpërndarjen e oksigjenit dhe lëndëve ushqyese dhe heqjen e nënprodukteve nga indet e trajtuara.
Aktiviteti i angiogjenezës rregullohet duke stimuluar faktorin angiogjenik VEGF dhe faktorët anti-angiogjenë (p.sh., angiostatina dhe trombospondina-1 [TSP-1]).Në mikromjedisin e sëmurë dhe të degraduar (përfshirë tensionin e ulët të oksigjenit, pH të ulët dhe nivel të lartë të acidit laktik), faktorët lokalë angiogjenë do të rivendosin aktivitetin e angiogjenezës.
Disa media të tretshme në trombocitet, të tilla si FGF bazë dhe TGF-β dhe VEGF mund të stimulojnë qelizat endoteliale për të prodhuar enë të reja gjaku.Landsdown dhe Fortier raportuan rezultate të ndryshme në lidhje me përbërjen e PRP, duke përfshirë burimet brenda trombociteve të shumë rregullatorëve angiogjenë.Përveç kësaj, ata arritën në përfundimin se rritja e angiogjenezës kontribuon në shërimin e sëmundjes MSK në zonat me vaskularizim të dobët, siç janë çarja e meniskut, lëndimi i tendinit dhe zona të tjera me vaskularizim të dobët.
Promovimi dhe vetitë anti-angiogjene të trombociteve
Në dekadat e fundit, studimet e publikuara kanë vërtetuar se trombocitet luajnë një rol kyç në hemostazën parësore, formimin e mpiksjes, faktorin e rritjes dhe çlirimin e citokinës dhe rregullimin e angiogjenezës si pjesë e procesit të riparimit të indeve.Në mënyrë paradoksale, granulat PRP α- përmbajnë një arsenal faktorësh të rritjes pro-angiogjene, proteina anti-angiogjene dhe citokina (të tilla si PF4, inhibitori i aktivizuesit të plazminogenit-1 dhe TSP-1) dhe synojnë çlirimin e faktorëve specifikë që luajnë një rol. .Roli në angiogjenezë.Prandaj, roli i PRP në kontrollin e rregullimit të angiogjenezës mund të përcaktohet nga aktivizimi i receptorëve specifikë të sipërfaqes qelizore, TGF-β Fillon reaksionet pro-angiogjene dhe anti-angiogjene.Aftësia e trombociteve për të ushtruar rrugën e angiogjenezës është konfirmuar në angiogjenezën patologjike dhe angiogjenezën tumorale.
Faktori i rritjes angiogjene me prejardhje nga trombocitet dhe faktori i rritjes anti-angiogjen, që rrjedh nga molekulat α- Dhe të dendura dhe ngjitëse.Më e rëndësishmja, përgjithësisht pranohet se efekti i përgjithshëm i trombociteve në angiogjenezë është pro-angiogjenik dhe stimulues.Pritet që terapia PRP të kontrollojë induksionin e angiogjenezës, e cila do të kontribuojë në efektin e trajtimit të shumë sëmundjeve, si shërimi i plagëve dhe riparimi i indeve.Administrimi i PRP, më konkretisht administrimi i PGF me përqendrim të lartë dhe citokina të tjera të trombociteve, mund të induktojë angiogjenezë, angiogjenezë dhe arteriogjenezë, sepse faktori 1a me prejardhje nga qeliza stromale lidhet me receptorin CXCR4 në qelizat paraardhëse endoteliale.Bill et al.Sugjerohet që PRP rrit neovaskularizimin ishemik, i cili mund të jetë për shkak të stimulimit të angiogjenezës, angiogjenezës dhe arteriogjenezës.Në modelin e tyre in vitro, proliferimi i qelizave endoteliale dhe formimi i kapilarëve u nxitën nga një numër i madh i PDG-ve të ndryshme, nga të cilat VEGF ishte stimuluesi kryesor angiogjenik.Një faktor tjetër i rëndësishëm dhe thelbësor për rivendosjen e rrugës së angiogjenezës është sinergjia midis PGF-ve të shumta.Richardson et al.U vërtetua se aktiviteti sinergjik i faktorit angiogjenik të rritjes nga trombocitet-bb (PDGF-BB) dhe VEGF çoi në formimin e shpejtë të rrjetit vaskular të pjekur në krahasim me aktivitetin e faktorit individual të rritjes.Efekti i kombinuar i këtyre faktorëve u konfirmua kohët e fundit në një studim mbi përmirësimin e qarkullimit kolateral cerebral te minjtë me hipoperfuzion afatgjatë.
Më e rëndësishmja, një studim in vitro mati efektin proliferativ të qelizave endoteliale të venave të kërthizës njerëzore dhe përqendrimeve të ndryshme të trombociteve në zgjedhjen e pajisjes për përgatitjen e PRP dhe strategjinë e dozës së trombociteve, dhe rezultatet treguan se doza optimale e trombociteve ishte 1.5 × 10 6 trombocitet / μ 50. Për të nxitur angiogjenezën.Përqendrimi shumë i lartë i trombociteve mund të pengojë procesin e angiogjenezës, kështu që efekti është i dobët.
Plakja e qelizave, plakja dhe PRP
Plakja e qelizave mund të shkaktohet nga stimuj të ndryshëm.Ky është një proces në të cilin qelizat ndalojnë ndarjen dhe i nënshtrohen ndryshimeve unike fenotipike për të parandaluar rritjen e pakufizuar të qelizave të dëmtuara, e cila luan një rol të rëndësishëm në parandalimin e kancerit.Në procesin e plakjes fiziologjike, plakja e riprodhimit të qelizave do të nxisë gjithashtu plakjen e qelizave dhe aftësia rigjeneruese e MSC-ve do të reduktohet.
Efektet e plakjes dhe plakjes së qelizave
In vivo, shumë lloje qelizash do të plaken dhe do të grumbullohen në inde të ndryshme gjatë plakjes, ndër të cilat ka një numër të madh qelizash të plakjes.Akumulimi i qelizave të plakjes duket se rritet me rritjen e moshës, dëmtimin e sistemit imunitar, dëmtimin e indeve ose faktorët e lidhur me stresin.Mekanizmi i plakjes qelizore është identifikuar si faktori patogjen i sëmundjeve të lidhura me moshën, si osteoartriti, osteoporoza dhe degjenerimi i diskut ndërvertebral.Një shumëllojshmëri stimujsh do të përkeqësojnë plakjen e qelizave.Si përgjigje, fenotipi sekretor i lidhur me plakjen (SASP) do të sekretojë përqendrime të larta të qelizave proteinike dhe citokinave.Ky fenotip i veçantë lidhet me qelizat e plakjes, në të cilat ato sekretojnë nivele të larta të citokinave inflamatore (si IL-1, IL-6, IL-8), faktorë të rritjes (si TGF-β, HGF, VEGF, PDGF), MMP, dhe katepsina.Krahasuar me të rinjtë, SAPS është vërtetuar se rritet me moshën, sepse procesi i gjendjes së qëndrueshme shkatërrohet, duke rezultuar në plakjen e qelizave dhe zvogëlimin e aftësisë rigjeneruese.Konkretisht, në sëmundjet e kyçeve dhe sëmundjet e muskujve skeletorë.Në këtë drejtim, plakja imune konsiderohet të jetë një ndryshim i rëndësishëm në spektrin e sekretimit të qelizave imune, duke treguar se përqendrimi i TNF-a, IL-6 dhe/ose Il-1b rritet, duke çuar në inflamacion kronik të shkallës së ulët.Vlen të theksohet se mosfunksionimi i qelizave staminale lidhet edhe me mekanizmat autonome joqelizore, siç janë plakja e qelizave, veçanërisht prodhimi i faktorëve pro-inflamator dhe anti-rigjenerues nëpërmjet SASP.
Përkundrazi, SASP gjithashtu mund të stimulojë plasticitetin e qelizave dhe riprogramimin e qelizave ngjitur.Përveç kësaj, SASP mund të organizojë komunikimin me ndërmjetës të ndryshëm imunitarë dhe të aktivizojë qelizat imune për të promovuar pastrimin e qelizave të plakjes.Kuptimi i rolit dhe funksionit të qelizave të plakjes do të kontribuojë në shërimin dhe rimodelimin e indeve të muskujve MSK dhe plagëve kronike.
Vlen të përmendet se Ritcka et al.U krye një studim i gjerë dhe u zbulua roli kryesor dhe i dobishëm i SASP në promovimin e plasticitetit të qelizave dhe rigjenerimit të indeve dhe u prezantua koncepti i dhënies së trajtimit kalimtar të qelizave të plakjes.Ata përmendën me kujdes se plakja është kryesisht një proces i dobishëm dhe rigjenerues.
Plakja e qelizave dhe potenciali i PRP
Ndërsa numri i qelizave staminale zvogëlohet, plakja do të ndikojë në performancën e qelizave burimore.Në mënyrë të ngjashme, tek njerëzit, karakteristikat e qelizave burimore (të tilla si thatësia, përhapja dhe diferencimi) gjithashtu ulen me moshën.Wang dhe Nirmala raportuan se plakja do të zvogëlonte karakteristikat e qelizave burimore të qelizave të tendinit dhe numrin e receptorëve të faktorit të rritjes.Një studim i kafshëve tregoi se përqendrimi i PDGF në kuajt e rinj ishte i lartë.Ata arritën në përfundimin se rritja e numrit të receptorëve GF dhe numrit të GF tek individët e rinj mund të ketë një përgjigje më të mirë qelizore ndaj trajtimit PRP sesa individët më të vjetër në individë të rinj.Këto gjetje zbulojnë pse trajtimi PRP mund të jetë më pak efektiv apo edhe joefektiv në pacientët e moshuar me më pak qeliza staminale dhe "cilësi të dobët".Është vërtetuar se procesi i plakjes së kërcit përmbyset dhe periudha e pushimit të kondrociteve rritet pas injektimit PRP.Jia et al.Përdoret për të studiuar fibroblastet dermale të miut në fotoplakje in vitro, me dhe pa trajtim PRP, për të sqaruar mekanizmin e kundërveprimit të PGF në këtë model.Grupi PRP tregoi një efekt të drejtpërdrejtë në matricën jashtëqelizore, rrit kolagjenin e tipit I dhe uli sintezën e metalloproteinazave, duke treguar se PRP mund të kundërshtojë plakjen e qelizave, si dhe në sëmundjen degjenerative MSK.
Në një studim tjetër, PRP u përdor për të mbledhur qelizat burimore të palcës së eshtrave të moshuar nga minjtë e moshuar.Është përcaktuar se PRP mund të rikuperojë një sërë funksionesh të qelizave burimore nga plakja, të tilla si përhapja e qelizave dhe formimi i kolonive, dhe të rindërtojë shënuesit që lidhen me plakjen e qelizave.
Kohët e fundit, Oberlohr dhe kolegët e tij studiuan gjerësisht rolin e plakjes së qelizave në dobësimin e rigjenerimit të muskujve dhe vlerësuan PRP dhe plazmën e varfër me trombocitet (PPP) si opsione trajtimi biologjik për riparimin e muskujve skeletik.Ata parashikuan që trajtimi PRP ose PPP për riparimin e muskujve skeletik do të bazohej në faktorë biologjikë të përshtatur për shënuesit e qelizave specifike SASP dhe faktorë të tjerë që çojnë në zhvillimin e fibrozës.
Është e arsyeshme të besohet se përpara aplikimit të PRP, plakja e synuar e qelizave mund të përmirësojë karakteristikat e rigjenerimit të efikasitetit të trajtimit biologjik duke reduktuar faktorët lokalë SASP.Është sugjeruar që një opsion tjetër për të përmirësuar rezultatet e trajtimit PRP dhe PPP për rigjenerimin e muskujve skeletik është heqja selektive e qelizave të plakjes me pastrues të plakjes.Nuk ka dyshim se rezultatet e hulumtimit të fundit mbi efektin e PRP në plakjen dhe plakjen e qelizave janë magjepsëse, por ato janë ende në fazën fillestare.Prandaj, është e paarsyeshme të bësh ndonjë sugjerim në këtë moment.
(Përmbajtja e këtij artikulli është ribotuar dhe ne nuk japim asnjë garanci të shprehur ose të nënkuptuar për saktësinë, besueshmërinë ose plotësinë e përmbajtjeve të përfshira në këtë artikull dhe nuk jemi përgjegjës për opinionet e këtij artikulli, ju lutemi kuptoni).
Koha e postimit: Mar-01-2023